冠状动脉粥样硬化性心脏病（CORONARYATHER OSECLEROTICHEARTDISEASE），是临床常见心血管疾病，主要是因冠状动脉发育异常、冠状动脉狭窄等冠状动脉结构异常，以及冠状动脉痉挛等功能异常，导致血管腔狭窄，进而诱发心肌缺血缺氧而致心脏疾病。冠状动脉粥样硬化性心脏病与冠状动脉功能性改变可统称为“冠状动脉性心脏病”[1-2]。目前临床研究冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死并不少，而且逐渐被人们越来越重视与关注。临床对于冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死的研究主要通过调查方法、尸体解剖方法，以给予案例相关因素实施法医病理学检测、法医病理学分析，从而得出明确死亡原因结论，以给予法律审判提供有效鉴定依据[3-4]。该次研究工作选择自2010年1月—2016年12月冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死患者尸检案例50例作为研究对象，旨在探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死的法医病理学。现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

方便选择冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死患者尸检案例50例作为研究对象，命名为研究组（n=50）；另选择非冠状动脉粥样硬化性心脏病猝死患者尸检案例50例作为研究对象，命名为对照组（n=50）。研究组：性别：男性患者有28例，女性患者有22例；年龄：25～78岁之间，平均年龄为（52.）岁。 对照组：性别：男性患者有30例，女性患者有20例；年龄：24～79岁之间，平均年龄为（51.）岁。两组研究对象的一般资料均差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2方法

研究组与对照组均接受法医病理学检测。法医病理学检测方法具体操作如下。

（1）试剂选择。兔抗人多克隆抗体（CX40）均选自武汉博士德工程有限公司生产；S-P免疫组化试剂盒均选自PROTEINTECH公司生产；DAB显色血液均选自PROTEINTECH公司生产；石蜡包埋组织MICRO RNA快速提取试剂盒均选自LIFETECH-NOLOGIES（美国）公司生产；TAQMAN MICRO RNA反转录试剂盒均选自LIFETECH-NOLOGIES（美国）公司生产；分析试剂盒均选自LIFETECH-NOLOGIES（美国）公司生产。

（2）心脏组织与石蜡切片制备。①取材。心脏组织标本取左心室心肌组织一块、右心室心肌组织一块、室间隔肌壁心肌组织一块，大小约为1.2 mm×1.2mm×1.2 mm。②固定。首先给予组织块平衡盐溶液清洗，接着置于10%甲醛固定液中，持续24 h。③石蜡切片制备。使用梯度乙醇脱水，使用二甲苯溶液作透明浸蜡，使用专门切片机切片，大小约为 4～6 μm[5]。

（3）HE（苏木素伊红）染色。放入已入蒸馏水切片于HE溶液中，进行数分钟染色；接着放入酸水分色数秒及氨水分色数秒；接着以流水持续冲洗1～15 min；接着放入70%酒精持续脱水10 min及90%酒精持续脱水10 min；接着放入HE染色持续23 min；接着将切片以纯酒精脱水及二甲苯透明；最后使用中性树胶封固[6]。

（4）免疫组织化学染色。免疫组织化学染色选择SP免疫组化试剂盒程序实施，首先将石蜡切片脱蜡至水；接着放置于3%H2O2室温进行孵育，持续孵育5～10 min，以有效消除内源性过氧化物酶活性；接着放入蒸馏水进行冲洗，接着放入PBS浸泡5 min；接着放入5%～10%正常兔血清作封闭，并放置于室温持续孵育10 min。接着将血清倾去，勿洗，滴入适当稀释比例的一抗工作液，并放置于37℃持续孵育1～2 h（或放置于4℃过夜）；使用 PBS冲洗（5 mi/次 n，共 3次）；滴入适当稀释比例的生物素标记二抗，并放置于37℃持续孵育10～30 min（或者滴入适当稀释比例的第二代生物素，并放置于37℃持续孵育 10～30 min），接着使用 PBS冲洗（5 min/次，共3次）；滴入适当稀释比例的辣根酶标记链霉卵白素生物素标记二抗，并放置于37℃持续孵育10～30min，接着使用 PBS 冲洗（5 min/次，共 3 次）；接着给予显色剂显色处理；接着给予自来水作充分冲洗、复染以及封片。在空白对照时的染色中选择PBS缓冲液[7]。

（5）石蜡包埋。使用石蜡包埋组织MICRO RNA快速提取试剂盒程序进行石蜡包埋处理[8]。

1.3观察指标

观察比较两组的管壁测量值 （包括内膜厚度、中膜厚度）、心脏重量以及心室壁厚度（包括左心室、右心室）。

1.4统计方法

应用SPSS 23.0统计学软件进行处理分析两组数据资料，以（±s）表示计量资料，使用t检验；P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1研究组与对照组的管壁测量值比较

与对照组比较，研究组男性内膜厚度更高（t=9.600 6，P=0.000 0）；研究组女性内膜厚度更高（t=9.559 5，P=0.000 0）；研究组男性中膜厚度更高（t=36.644 9，P=0.000 0）；研究组女性中膜厚度更高（t=50.552 2，P=0.000 0）。 见表 1。

文章来源：《中国分子心脏病学杂志》 网址: http://www.zgfzxzbxzzzz.cn/qikandaodu/2021/0626/551.html

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